GenEvolutioN a le plaisir de présenter de nouvelles découvertes sur un test de transformation cellulaire (CTA) miniaturisé. miniaturisé de transformation cellulaire (CTA)miniaturisé, amélioré par marquage fluorescent pour améliorer la précision et la sensibilité l'identification des substances cancérogènes non génotoxiques. Développé à partir des cellules cellules Bhas 42-une lignée de fibroblastes de souris 3T3 transfectée avec le gène Ras, cette méthode est prometteuse pour les matériaux en contact avec les aliments (FCM). matériaux en contact avec les aliments (FCM)où substances ajoutées non intentionnellement (NIAS) peuvent présenter des risques cachés pour la santé.
1. Pourquoi se concentrer sur les substances cancérogènes non génotoxiques ?
Tous les agents cancérogènes n'endommagent pas directement l'ADN (génotoxicité) ; certains agissent par des voies épigénétiques ou indirectes. par des voies épigénétiques ou indirectesParmi les substances cancérogènes, on peut citer
- Modification de la signalisation cellulaire
- Augmentation de la prolifération cellulaire
- Affectant les réponses immunitaires ou l'apoptose
Dans le domaine des Matériaux en contact avec les alimentsLes substances ajoutées non intentionnellement (NIAS) peuvent migrer dans les aliments sans jamais avoir été délibérément introduites dans le processus de fabrication. La détection de ces risques cachés est essentielle pour la sécurité des consommateurs et la conformité aux réglementations.
2. Comment fonctionne le CTA miniaturisé
Bhas 42 Cellules
- Cellules de fibroblastes modifiées portant plusieurs copies du gène Ras.
- Pré-initié pour révéler les premières étapes de la transformation.
Indicateurs clés de la transformation
- Coloration basophile et cellules fusiformes
- Croissance multicouche (empilement de cellules) et orientation aléatoire
- Croissance invasive dans la monocouche
Marquage fluorescent avec BMVC
- Une nouvelle méthode de coloration qui met en évidence foyers transformés sous fluorescence.
- Permet une identification plus précise et cohérente ainsi qu'une analyse quantitative de la transformation cellulaire.
En utilisant plaques à 96 puitsles chercheurs peuvent évaluer la transformation cellulaire avec moins de matériel d'essaice qui permet d'économiser à la fois temps et de ressources.
3. Combiner l'analyse génomique et le marquage fluorescent
Le flux de travail CTA amélioré de GenEvolutioN comprend :
- Profilage transcriptomique : identifie les gènes gènes régulés à la hausse ou à la baisse liés aux processus cancérigènes (par exemple, l'adhésion cellulaire, l'apoptose, la réponse immunitaire).
- Marquage fluorescent BMVC : permet détection spectrophotométrique des cellules transformées, réduisant ainsi la dépendance à l'égard de l'observation manuelle.
- Collecte automatisée des données : efforts continus pour intégrer les laveurs/lecteurs de microplaques laveurs/lecteurs de microplaques pour rationaliser le rinçage, la détection des foyers et l'interprétation des données.
4. Applications des matériaux en contact avec les aliments (FCM)
Les substances ajoutées de manière non intentionnelle (NIAS) dans les FCM peuvent présenter des risques sanitaires à long terme si elles présentent des propriétés cancérigènes. Les tests de génotoxicité standard peuvent ne pas détecter les cancérogènes indirects. L'essai CTA amélioré:
- Détecte les carcinogènes non génotoxiques que les tests conventionnels de dommages à l'ADN pourraient ne pas détecter.
- Évalue les mélanges complexes ou des extraits de matériaux d'emballage, en identifiant rapidement les problèmes de sécurité potentiels.
- S'aligne sur règlements de l'UE et les normes mondiales visant à réduire les risques chimiques non identifiés dans les produits de consommation.
5. Perspectives d'avenir : Automatisation et tests plus larges
L'étude propose :
- Automatisation du rinçage et de l'analyse des foyers : tirer parti des laveurs/lecteurs de microplaques laveurs/lecteurs de microplaques pour accélérer le processus d'analyse.
- Réduction de la variabilité sérique : enquête le sérum non fœtal ou les milieux à faible teneur en sérum pour obtenir des résultats cohérents et reproductibles.
- Regards sur l'épigénétique : explorer l'hyperméthylation ou l'hypométhylation les changements dans la compaction de l'ADN afin d'identifier d'autres mécanismes non génotoxiques.
Ce test Ce test de transformation cellulaire miniaturisé et amélioré par la fluorescence marque une avancée significative dans la la détection de substances cancérigènes non génotoxiques-particulièrement important pour les matériaux en contact avec les alimentsoù des substances cachées peuvent migrer dans les produits de consommation. En combinant l'imagerie avancée et analyse transcriptomiquela dernière méthode de GenEvolutioN offre une grande précision, fiabilitéet tests éthiques des alternatives aux études traditionnelles sur les animaux.
Références (sélection)
- Kirsch A. et al. (2020). Chem Biol Interact, 315:108900.
- Maeshima H. et al. (2009). Toxicol In Vitro, 23(1):148-57.
- Mascolo MG. et al. (2018). Carcinogenesis, 39(7):955-967.
- Ohmori K. et al. (2022). Int J Mol Sci, 23(6):3216.
- Rohrbeck A. et al. (2010). Toxicol Sci, 118(1):31-41.
