GenEvolutioN a le plaisir de partager de nouvelles découvertes sur l'utilisation de la coloration FISH des télomères et des centromères. coloration FISH des télomères et des centromères (hybridation in situ en fluorescence) pour améliorer la détection d'aberrations chromosomiques. aberrations chromosomiques dans un dosage des chromosomes dicentriques (DCA). Réalisé dans le cadre du projet RENEB 2021 cette approche améliore significativement la précision de la dosimétrie biologique. dosimétrie biologiquenotamment pour les applications en médecine d'urgence des rayonnements et les criblages génotoxiques à grande échelle.
1. Contexte et objectifs
En cas d'urgence radiologique ou nucléaire, une estimation rapide et précise de la dose est vitale pour le triage et la prise de décision médicale immédiate. Les méthodes conventionnelles d'ACD reposent souvent sur techniques de coloration uniforme (par exemple, Giemsa ou DAPI), qui peuvent sous-estimer certaines aberrations. En revanche, la coloration par FISH des télomères et des centromères fournit des des marqueurs fluorescents distincts aux extrémités des chromosomes et aux régions du centromère, ce qui améliore la détection des dicentriques qui pourraient autrement passer inaperçus.
Objectifs clés :
-Améliorer la détection: Réduire la sous-estimation des chromosomes dicentriques en utilisant la coloration FISH.
-Évaluer la faisabilité: Évaluer la facilité d'utilisation et la fiabilité dans des conditions d'urgence (mode triage).
- Comparer les points finaux: Étudier deux tests cytogénétiques-le test des chromosomes dicentriques (DCA) et dosage des micronoyaux par blocage de la cytokinèse (CBMN)-pour classer avec précision les niveaux d'exposition.
2. Méthodes : Comparaison inter-laboratoires RENEB
Conception de l'étude
- Trois échantillons en aveugle exposés à des rayons X de 0,0, 1,2 et 3,5 Gy.
- Sang total provenant d'un seul donneur (homme, 32 ans).
-Laboratoires multiples: 14 laboratoires pour le test CBMN, 33 laboratoires pour le DCA.
-Chaque laboratoire a fourni des estimations de doses dans un délai très court, simulant un scénario d'urgence. scénario d'urgence d'urgence.
Coloration FISH des télomères et des centromères
-Sondes télomère (rouge) et centromère (vert): Mettent clairement en évidence les extrémités des chromosomes et les centromères.
-Amélioration de l'identification des aberrations: Distinguer les chromosomes véritablement dicentriques des centromères étroitement adjacents qui apparaissent comme une seule entité sous une coloration uniforme.
Points finaux
1. Essai sur les chromosomes dicentriques (DCA)
-150 métaphases notées par échantillon en mode semi-automatique mode semi-automatique.
-Expertise de haut niveau requis pour le Giemsa, plus simple pour la coloration FISH.
2. Test du micronoyau en bloc cytokinèse (CBMN)
-1000 cellules binucléées (BN) notées en mode semi-automatique mode semi-automatique.
-La FISH peut également être utilisée pour différencier les cellules clastogènes. clastogènes (télomères positifs, centromères négatifs) des cellules aneugénique (centromère positif) des micronoyaux aneugéniques.
3. Principales conclusions
-Réduction du nombre de dicentriques: FISH télomère-centromère minimise les faux négatifs en révélant que les centromères étroitement espacés sont réellement séparés.
-Estimation précise de la dose: L'ACD et le CBMN ont tous deux classé les échantillons en aveugle dans des catégories de triage correctes (faible, moyen, élevé). dans les catégories de triage correctes (faible, moyen, élevé).
-Mode de triage plus rapide: Les laboratoires participants ont communiqué leurs résultats rapidement, ce qui a permis de soutenir la gestion médicale d'urgence.
-Facilité d'interprétation: Les signaux FISH fournissent une une indication plus claire et plus directe de la rupture ou de la mauvaise ségrégation des chromosomes. directe de la rupture ou de la mauvaise ségrégation des chromosomes, ce qui abaisse le seuil de compétence requis par rapport aux colorations uniformes.
4. Implications pour la médecine d'urgence des rayonnements
1.Haut débit: Cette approche s'adapte bien au traitement de grandes cohortes, ce qui est crucial lors d'événements d'exposition massive. lors d'événements d'exposition massive.
2.Fiabilité améliorée: L'identification précoce des personnes fortement exposées permet des interventions cliniques opportunes.
3.Applications polyvalentes: Au-delà des urgences radiologiques, la FISH télomère-centromère peut améliorer la détection des agents génotoxiques dans les industries chimiques ou pharmaceutiques. les industries chimiques ou pharmaceutiques.
La participation de GenEvolutioN au projet RENEB 2021 démontre comment la FISH télomère-centromère du centromère révolutionne les essais sur les chromosomes dicentriques. En réduisant réduisant la sous-estimation des dicentriques et en rationalisation de la détectionles laboratoires bénéficient d'une méthode robuste et précise méthode de dosimétrie biologiqueLa dosimétrie biologique est un outil essentiel à la fois pour l'intervention d'urgence et les évaluations toxicologiques de routine.
